Меню

Вопросы диагностики онкоцитарных новообразований щитовидной железы в рамках оптимизированного протокола обследования

22.3.2. Паращитовидные железы

22.3.2.1. Внешний вид

1. Имеются 4 паращитовидные железы (1) —

две правые и две левые; причём, на каждой стороне — верхняя и нижняя.

2. Расположены они на задней поверхности боковых долей щитовидной железы (2) и часто погружены в её капсулу.

3. а) Размеры каждой железы — очень невелики: 642 мм.

б) Всё это приводит к тому, что при оперативном удалении части щитовидной железы (например, в связи с наличием в ней опухоли)

существует реальная опасность удалить и околощитовидные железы.

Рисунок — паращитовидные железы.

4. а) Развиваются эти железы

из эпителия III и IV жаберных карманов глотки.

б) Здесь происходят интенсивные клеточные деления, в результате чего образуются компактные скопления клеток.

в) Затем эти скопления отделяются от жаберных карманов и мигрируют к местам постоянной локализации.

22.3.2.2. Общий план строения

1. Капсула и строма.

а) Каждая паращитовидная железа покрыта соединительнотканной капсулой.

б) А. От неё отходят прослойки рыхлой соединительной ткани (1),

составляющие строму железы и содержащие многочисленные кровеносные сосуды.

Б. Так, на снимке мы видим мелкую артерию (2.А) и вену (2.Б).

в) Кроме того, имеются прослойки жировой ткани.

4,а. Препарат – паращитовидная железа. Окраска гематоксилин-эозином.

(Малое увеличение)

а) Основной же компонент железы – клетки железистого эпителия, паратироциты (3). Они

нередко сгруппированы в мелкие розеткообразные структуры,

но могут образовывать также тяжи и компактные скопления.

б) В пожилом возрасте в околощитовидных железах появляются и фолликулы. Однако содержащаяся в их просвете коллоидоподобная жидкость лишена веществ с гормональной активностью.

22.3.2.3. Виды паратироцитов

I. Два вида паратироцитов

1. а) Выделяют два вида секреторных клеток (3):

главные паратироциты (с базофильной цитоплазмой) и

оксифильные паратироциты

(Иногда говорят также о переходных паратироцитах.)

б) Несмотря на различие в тинкториальных свойствах, на препарате эти клетки обычно трудно различимы.

2. Кроме паратироцитов (3), на приведённом снимке видны также

прослойки рыхлой соединительной ткани (1) и капилляры (4).

4,б. Препарат – паращитовидная железа. Окраска гематоксилин- эозином.

(Большое увеличение)

II. Главные паратироциты

а) Главные паратироциты — мелкие клетки полигональной формы.

б) Из-за их небольших размеров,

ядра соседних клеток лежат близко друг к другу и создаётся впечатление очень плотного расположения клеток в железе.

в) В свою очередь, главные паратироциты делятся на

тёмные – активно функционирующие клетки, и

светлые – видимо, неактивные, покоящиеся клетки.

а) Именно тёмные главные паратироциты образуют гормон околощитовидных желёз –

паратгормон, повышающий содержание Са 2+ в крови.

б) Он является полипептидом, поэтому в тёмных клетках – много рибосом (в составе шероховатой ЭПС).

в) Отсюда – базофилия их цитоплазмы, сообщающая клеткам тёмный вид.

а) При удалении паращитовидных желёз развивается тетания — судорожное состояние, обусловленное резким снижением концентрации в крови ионов Са 2+ .

б) Механизм тетании связан с тем, что

Са 2+ уменьшает возбудимость мышечных и нервных мембран (блокируя в них ионные каналы),

отчего при недостатке Са 2+ в крови возбудимость возрастает.

III. Оксифильные паратироциты

а) Эти клетки по размеру крупней, чем главные клетки, а их цитоплазма, как следует из названия, – оксифильная.

б) Бoльшую часть объёма клеток занимают крупные митохондрии, расположенные порой очень плотно

Накопление с возрастом

С возрастом количество оксифильных паратироцитов в околощитовидных железах увеличивается.

а) Функция оксифильных паратироцитов (так же, как функция оксифильных клеток Ашкенази в щитовидной железе) не ясна.

б) Есть мнение, что и те, и другие клетки являются продуктом дегенерации основных гормонпродуцирующих клеток.

в) Но этому противоречит высокая активность в оксифильных клетках митохондриальных ферментов.

Источник

Клинические тесты

*Импакт фактор за 2018 г. по данным РИНЦ

Читайте в новом номере

Из представленных вариантов ответов выберите те, которые, по Вашему мнению, являются правильным.

1. Заболевание, при котором развивается нефротический синдром:
а) амилоидоз;
б) пневмония;
в) вирусный перикардит;
г) трихинеллез;
д) хронический гепатит.

2. У больного 45 лет имеется хронический остеомиелит правой бедренной кости. В моче: белок – 1,66 г/л, лейкоциты – 4–6 в п/зр., эритроциты — единичные в п/зр., имеются гиалиновые цилиндры. Установите вероятный диагноз:
а) хронический пиелонефрит;
б) хронический гломерулонефрит;
в) амилоидоз почек;
г) тромбоз почечных вен;
д) возможно все.

3. Клинические проявления болезни Рандю–Ослера:
а) наличие телеангиэктазий;
б) васкулитно-пурпурный тип кровоточивости;
в) развитие железодефицитной анемии;
г) рецидивирующие носовые кровотечения;
д) гемартрозы.

4. Критерии диагностики миеломной болезни:
а) пониженное содержание плазмоцитов в костном мозге;
б) повышенное содержание плазмоцитов в костном мозге;
в) наличие парапротеинов в сыворотке крови;
г) наличие парапротеинов в моче.

5. Укажите основной диагностический признак при дифференциальной диагностике болезни Минковского– Шоффара и синдрома Жильбера:
а) уровень билирубина;
б) общее состояние больного;
в) возраст больного;
г) морфология эритроцитов;
д) уровень гемоглобина.

6. При гипогликемической коме кожные покровы:
а) гиперемированы;
б) влажные;
в) желтушные;
г) сухие.

7. Характерный запах изо рта при гипергликемической коме:
а) алкоголя;
б) аммиака;
в) ацетона;
г) тухлых яиц.

8. Снижение памяти, запор, брадикардия наблюдаются при:
а) гипотиреозе;
б) диффузном токсическом зобе;
в) сахарном диабете;
г) феохромоцитоме.

9. Сухость кожи, кожный зуд, жажда и полиурия наблюдаются при:
а) гипотиреозе;
б) диффузном токсическом зобе;
в) сахарном диабете;
г) эндемическом зобе.

10. При остром гломерулонефрите развивается:
а) глюкозурия;
б) дизурия;
в) олигурия;
г) полиурия.

11. При пиелонефрите преимущественно поражаются почечные:
а) чашечки;
б) канальцы;
в) клубочки;
г) клубочки и канальцы.

12. 64-летняя женщина в течение последних 3 мес. стала замечать снижение частоты дефекаций до 1–2 раз в неделю, беспокоит чувство неполного опорожнения кишечника. Несколько раз замечала в кале прожилки крови. Какова наиболее вероятная причина приведенной симптоматики?
а) колоректальный рак;
б) рецидивирующий геморрой;
в) язвенный колит;
г) синдром раздраженной кишки;
д) толстокишечная локализация болезни Крона.

Читайте также:  Тесты по общей неврологии 4 курс стр 2 из 3

13. У 61-летнего мужчины в течение 3 мес. наблюдаются прогрессирующие запоры (с 3 раз в неделю в начале до 1 раза в 7–10 дней), нередко после отсутствия дефекации пациент отмечает появление жидкого стула. Часто отмечает тенезмы и выделение алой крови с калом. За это время похудел на 6 кг. Наиболее вероятный диагноз у пациента:
а) рак нисходящего отдела толстой кишки;
б) болезнь Крона с локализацией в толстой кишке;
в) рак прямой кишки;
г) анальная трещина;
д) язвенный колит.

14. Больной с подагрой советуется с врачом по поводу диеты. Он перечисляет продукты, которые любит. Выберите из его списка продукт, содержащий наиболее высокую концентрацию пуринов и подлежащий исключению из рациона:
а) огурцы;
б) шашлык;
в) отварной картофель;
г) мандарины;
д) макароны.

15. При каком патологическом состоянии встречается следующее: плевральный выпот-экссудат серозный или геморрагический, с высоким содержанием эозинофилов, количество экссудата невелико, однако после пункции может накапливаться вновь; характерны боли в грудной клетке, больше слева, наличие выпота не только в плевре, но и в перикарде, повышение температуры, в анализе крови – лейкоцитоз, повышение СОЭ:
а) синдром Меллори–Вейса;
б) синдром Кона;
в) синдром Дресслера;
г) нефротический синдром;
д) синдром Иценко–Кушинга.

16. Для какого заболевания характерен плевральный выпот, содержащий 10–40% белка, отн. плотность 1008–1017, односторонний, геморрагический, после эвакуации не возобновляющийся:
а) инфаркт легкого;
б) инфаркт миокарда;
в) инфаркт селезенки;
г) рак поджелудочной железы;
д) рак легкого.

17. Экссудат считается геморрагическим, если количество эритроцитов в выпоте содержится:
а) 500–1000 в мкл;
б) 1000–2000 в мкл;
в) больше 3000 в мкл;
г) больше 5000 в мкл;
д) больше 10 000 в мкл.

18. Можно заподозрить туберкулезную инфекцию при содержании в плевральном выпоте:
а) 10–15% эозинофилов;
б) 30–50% эозинофилов;
в) 20–30% лимфоцитов;
г) больше 30% лимфоцитов;
д) больше 50% лимфоцитов.

19. Хилоторакс образуется при:
а) травме;
б) пневмонии;
в) абсцедировании легкого;
г) метастатическом повреждении плевры;
д) перикардите.

20. У больного с выраженным нефротическим синдромом внезапно появились боли в животе без точной локализации, тошнота, рвота, повысилась температура до 39°С, на коже передней брюшной стенки и бедрах – эритемы. Наиболее вероятная причина:
а) бактериальный перитонит;
б) абдоминальный нефротический криз;
в) почечная колика;
г) апостематозный пиелонефрит;
д) кишечная колика.

21. Больному 27 лет. Легочные заболевания в прошлом отрицает. 1 ч назад на фоне полного здоровья появились внезапно сильные боли в левой половине грудной клетки, нехватка воздуха. Температура нормальная. Дыхание над левым легким не выслушивается, при перкуссии – «коробочный» звук. Средостение перкуторно смещено вправо. У него необходимо заподозрить:
а) фибринозный плеврит;
б) инфаркт миокарда;
в) туберкулез легкого;
г) спонтанный пневмоторакс;
д) ущемленную диафрагмальную грыжу.

22. У 45-летнего больного, слесаря по профессии, обнаружены гипертрофия околоушных, слюнных желез, контрактура Дюпюитрена, протеинурия (2,5 г/л), гематурия (40–60 в п/зр.). Уровень IgA в крови повышен. Наиболее вероятный диагноз:
а) идиопатический IgA-нефрит;
б) гломерулонефрит при геморрагическом васкулите;
в) гломерулонефрит алкогольной этиологии;
г) волчаночный гломерулонефрит;
д) хронический пиелонефрит.

23. У 16-летней больной, страдающей остеомиелитом левой голени, появились отеки, асцит, гидроторакс. При обследовании обнаружен нефротический синдром, гепатоспленомегалия. Уровень фибриногена в крови резко повышен. Вероятный диагноз:
а) постинфекционный гломерулонефрит;
б) декомпенсированный цирроз печени;
в) гепаторенальный синдром;
г) вторичный амилоидоз с поражением почек;
д) волчаночный гломерулонефрит.

24. 50-летняя больная жалуется на упадок сил и боли в позвоночнике, уровень гемоглобина в крови – 65 г/л, протеинурия – 22 г, уровень альбуминов сыворотки – 40 г/л. Наиболее вероятный диагноз:
а) хронический гломерулонефрит в стадии уремии;
б) миеломная болезнь;
в) вторичный амилоидоз с поражением почек;
г) хронический пиелонефрит;
д) поликистоз почек.

25. У 45-летнего больного в течение 4 мес. отмечаются лихорадка, эпизоды безболезненной макрогематурии. Уровень гемоглобина в крови – 160 г/л, СОЭ – 60 мм/ч. Наиболее вероятный диагноз:
а) хронический гломерулонефрит гематурического типа;
б) волчаночный нефрит;
в) рак почки;
г) уратный нефролитиаз;
д) амилоидоз.

1 – а. 2 – в. 3 – а, в, г. 4 – б, в, г. 5 – г. 6 – б. 7 – в. 8 – а. 9 – в. 10 – в. 11 – а. 12 – а. 13 – а. 14 – б. 15 – в. 16 – а. 17 – д. 18 – д. 19 – а. 20 – б. 21 – г. 22 – в. 23 – г. 24 – б. 25 – в.

Источник



Вопросы диагностики онкоцитарных новообразований щитовидной железы в рамках оптимизированного протокола обследования

Три вида клеток

Паренхима щитовидной железы (ЩЖ) представлена тремя видами клеток, отличающимися друг от друга ультраструктурно, гистохи-мически и функционально (Краевский Н.А. и соавт., 1971; Краевский Н.А., Райхлин Н.Т., 1975): фолликулярными (собственно тиреоци-ты), оксифильными (онкоциты, называемые также клетками Ашкенази-Гюртле) и пара-фолликулярными нейроэндокринными (С-клетки) (Бомаш Н.Ю., 1981; Пачес А.И., Пропп Р.М., 1984; LiVolsi V., 1990; Rosai J., 1996).

Клетки, выстилающие полость фолликулов, называются фолликулярными, или А-клетка-ми, составляют основную массу целлюлярного состава ЩЖ, бывают трех видов в зависимости от формы и осуществляют синтез йодсодер-жащих гормонов ЩЖ — тироксина и трийод-тиронина. Кубические А-клетки достигают в диаметре 12-13 мкм, цилиндрические А-клетки размером до 16-18 мкм несколько сужены в базальной части (основании), уплощенные А-клетки типично неправильно округлые при вариабельности размеров, но для ЩЖ чаще специфичны крупные формы. Изменения формы и размеров тирео-цитов многие авторы связывают с изменениями функционального состояния органа.

Парафолликулярные (С-клетки) ЩЖ, синтезирующие гормон кальцитонин, имеют округлую форму, светлую цитоплазму, локализуются обычно группами между фолликулами в виде островков и отделены от полости фолликула тиреоцитами. С-клетки относятся к АРШ-системе [1] , целлюлярные элементы которой продуцируют полипептидные гормоны и способны к накоплению предшественников моноаминов и их окислению до биогенных аминов (Бомаш Н.Ю., 1981; Долгов В.В. и соавт., 2002). В материале тонкоигольной аспи-рационной пункционной биопсии (ТиАПБ) ткани ЩЖ С-клетки встречаются редко. Они сходны с В-клетками, однако имеют меньшие размеры (8-14 мкм) и мелкую розового цвета зернистость цитоплазмы.

Читайте также:  Что такое Вторичный острый пиелонефрит

В-клетки (онкоциты, клетки Ашкенази-Гюртле, оксифильные клетки) располагаются в центре фолликулов, среди А-клеток, или между фолликулами, имеют относительно крупные размеры (от 15 до 25 мкм), округлую или шаровидную форму с эксцентрически расположенным ядром среднего или несколько большего размера. В цитоплазме имеется обильная крупная зернистость, окрашивающаяся в интенсивно красный или розовый цвет. Число клеток Ашкенази-Гюртле может быть различным — они могут быть единичными или, независимо от величины фолликула, выстилать его полностью или частично. В материале ТиАПБ эти клетки обнаруживаются в небольшом количестве, располагаются раздельно, а при пролиферации -образуют группы и пласты (рисунок 2). Ок-сифильные клетки отличаются от фолликулярного эпителия (тиреоцитов) значительно большей величиной, эозинофильной гранулированной цитоплазмой и округлым крупным ядром с выраженным ядрышком. Характерной особенностью ультраструктуры В-клеток является высокое содержание митохондрий (рисунок 3) округлой или овальной формы, среди которых расположены секреторные гранулы (За-ридзе Д.Г., 1976; Богданова Т.И. и соавт., 2000), нередко практически полностью заполняющие цитоплазму. Онкоциты обладают высокой метаболической активностью: в них обнаруживается высокая экспрессия окислительно-восстановительных ферментов, в частности, сукцинатдегидро-геназы, что отличает их от фолликулярного эпителия (Бомаш Н.Ю., 1981; Богданова Т.И. и соавт., 2000). В цитоплазме окси-фильных клеток Н.А. Краевским и соавторами. (1971), а также О.К. Хмельницким и сотрудниками (1974) были выявлены биогенные амины, в том числе — серотонин, а J.V Nesland и M.A. Sorbinho-Simoes (1985) -тиреоглобулин. Накопление биогенных аминов, по мнению этих авторов, является функцией В-клеток ЩЖ. Активность сукци-натдегидрогеназы в фолликулярных (А-) клетках низкая, иногда увеличивается при зобе, впрочем незначительно.

В литературе встречается мнение, что фолликулярные клетки и клетки Ашкенази-Гюртле близки между собой. Так, методами световой микроскопии обнаруживают переходные формы между ними, особенно заметные при аутоиммунном тиреоидите (АИТ) и диффузном токсическом зобе. Переходные формы описали В.Ф. Кондаленко и В.А. Одинокова (1973), изучая ультраструктуру онкоцитов при узловом нетоксическом зобе. Е.А. Смирнова (1974), исследуя опухоли ЩЖ гистологическими и гистохимическими методами, пришла к выводу о наличии общих стволовых элементов фолликулярных и оксифильных клеток ввиду образования ими одинаковых структур. Также интересен и требует интерпретации факт выявления среди гиперфункцио-нирующих (токсических) аденом ЩЖ новообразований из клеток Ашкенази-Гюртле, а также интенсивного накопления радиоактивного йода в выстланных онкоци-тами микрофолликулах в ходе гистоавто-радиографического исследования при АИТ (Бомаш Н.Ю., 1981). Упомянутые данные представляются нам требующими ряда дополнительных исследований.

Онкоциты в норме и при патологии

Онкоциты, или клетки Ашкенази-Гюртле, в умеренном количестве присутствуют в ткани здоровой ЩЖ. Процессы пролиферации и гиперплазии онкоцитов описаны и наблюдались нами при диагностике и исследовании некоторых патологических состояний органа. Сохраняя яркие морфологические отличия от фолликулярных, оксифильные клетки не всегда одинаковы. В аденомах они более однообразны, однако могут отличаться по величине в отдельных узлах. При токсическом зобе и АИТ онкоциты могут быть настолько полиморфны и атипичны (разные размеры клеток, гиперхром-ные ядра неправильной формы), что нередко возникает ошибочное подозрение в отношении злокачественного роста. При диффузном токсическом зобе, в особенности при выраженной гиперплазии эпителия, нередко обнаруживаются эпителиоциты, резко отличающиеся от остальных клеток ЩЖ -очень крупные с широкой эозинофильной зернистой цитоплазмой и резко гиперхром-ным крупным ядром, иногда неправильной формы (В-клетки). Они могут выстилать отдельные фолликулы, образовывать целые дольки, лежать обособленными мелкими группами или изолированно среди фиброзной ткани, а также образовывать узлы (аденомы). В большинстве случаев наблюдаются признаки очаговой лимфоидной инфильтрации вблизи крупных сосудов и участков пролиферации тиреоидного эпителия. В них возможна оксифильноклеточ-ная трансформация тиреоидных клеток, что свидетельствует о наличии у этих больных хронического тиреоидита (Богданова Т.И. и соавт., 2000) (рисунок 4). Онкоциты при диффузном токсическом зобе отличаются выраженным полиморфизмом, что нередко требует пристального внимания цитолога в ходе исследования, однако наличие лимфоидной инфильтрации может служить в данном случае четким дифференциально-диагностическим признаком.

При обследовании больных с АИТ наличие пролиферации В-клеток служит важным диагностическим признаком. Характерной особенностью при этом является обширная инфильтрация ЩЖ лимфоидны-ми клетками, формирование лимфоидных фолликулов с выраженными центрами деления, а также наличие очаговой окси-фильноклеточной трансформации тирео-идного эпителия (Бомаш Н.Ю., 1981; LiVolsi V., 1994). Последняя обычно отмечается в небольших фолликулах, расположенных вблизи крупных очагов лимфоидной инфильтрации. Степень оксифильноклеточ-ной трансформации у различных пациентов может значительно варьировать. Окси-фильноклеточная трансформация при пе-ритуморальном тиреоидите выражена слабо (Богданова Т.И. и соавт., 2002). Признаки АИТ обусловлены, главным образом, двумя процессами, развивающимися в ЩЖ при этом заболевании: лимфоплазмоци-тарной инфильтрацией и склерозированием стромы органа. При общем осмотре ткань ЩЖ больных АИТ имеет характерный вид: на темном фоне густой лимфоплазмо-цитарной инфильтрации ярко выделяются мелкие фолликулы, тяжи и отдельные клетки крупного светлого оксифильного эпителия (рисунок 6). Вид этих клеток очень характерен — клетки в 3-4 раза крупнее обычных, с широкой оксифильной зернистой цитоплазмой, ядра расположены центрально, часто гиперхромные (рисунок 7). Разная величина клеток, гиперхроматоз и полиморфизм ядер — все это может создавать ошибочные представления об опухолевом росте, однако наличие выраженной лимфоидной инфильтрации убеждает в воспалительной природе данной патологии. Гистохимическое исследование выявляет в этих клетках высокую активность сук-цинатдегидрогеназы.

Микроскопически АИТ сопровождается триадой гистологических изменений, описанных Хакару Хашимото: 1) диффузная лимфоплазмоцитарная инфильтрация с формированием многочисленных центров клеточного деления; 2) атрофия тиреоид-ных фолликулов, связанная с пролиферацией соединительной ткани; 3) выраженная оксифильноклеточная метаплазия, не очаговая, как при одноименном варианте хронического тиреоидита, а захватывающая обычно большую часть эпителия (Hashimoto H., 1912). В области лимфоплаз-моцитарной инфильтрации тиреоидный эпителий состоит из клеток Ашкенази-Гюр-тле, однако они могут быть меньших размеров и менее эозинофильны, что создает впечатление переходных форм между типичными онкоцитами и фолликулярным эпителием. В материале ТиАПБ у больных АИТ среди скоплений лимфоидных клеток наблюдаются отдельные кубические А-клетки, иногда их пласты или железистопо-добные структуры, пролиферирующий эпителий и большое количество В-клеток

Читайте также:  Кнопки подтверждения submit и очистки reset

При электронной микроскопии в цитоплазме этих клеток обычно определяются многочисленные митохондрии (рисунок 9) (Заридзе Д.Г., 1978; Богданова Т.И и соавт., 2002). Обнаружение в препарате ТиАПБ хотя бы единичных уплощенных А-клеток, наличие В-клеток и выраженной лимфоидной инфильтрации позволяет поставить диагноз. В пункционном материале при тиреоидите Риделя В-клетки отсутствуют.

Камни преткновения классификации

Вопрос о месте онкоцитарных неоплазий в классификации опухолей ЩЖ является дискуссионным. Некоторые авторы определяют аденому и карциному из клеток Ашкена-зи-Гюртле как отдельные виды новообразований органа, другие же не выделяют эти опухоли из множества фолликулярных аденом и карцином соответственно. Бесспорно, впрочем, что рак из В-клеток относится к дифференцированным злокачественным новообразованиям ЩЖ. В соответствии с классификацией ВОЗ

для тиреоидных опухолей, которую используем и мы в своей работе, онко-цитарные аденомы не выделяются в отдельную группу, а относятся к разновидности фолликулярных аденом (микрофолликулярных, трабекулярных или солидных), а оксифильноклеточные раки выделяются как варианты фолликулярной и папиллярной карцином с соответствующим гистологическим/цитологическим строением и поведением опухолей.

Гистологическая классификация опухолей щитовидной железы (Богданова Т.И. и соавт., 2000)

1. ЭПИТЕЛИАЛЬНЫЕ ОПУХОЛИ

1.1.1 фолликулярная аденома нормофолликулярная

— макрофолликулярная — микрофолликулярная — трабекулярная и солидная

1.2.1 Фолликулярная карцинома минимально инвазивная

Источник

БАЗОФИЛЬНЫЙ ТЕСТ

Базофильный тест (греческий basis основа + philia склонность; синоним тест Шелли) — метод диагностики специфической сенсибилизации организма, основанный на дегрануляции базофилов после добавления к ним специфического аллергена (рис.). Предложен Шелли (W. В. Shelley) в 1962 году. В последующие годы базофильный тест использован различными исследователями для изучения пыльцевой, лекарственной и пищевой аллергии. Базофильный тест получил признание как дополнительный тест для диагностики аллергических заболеваний и как метод выявления аллергических антител человека. Базофильные лейкоциты крови подобно тканевым тучным клеткам принимают участие в освобождении гистамина, гепарина, медленно реагирующей субстанций и серотонина. Считают, что реакция дегрануляции базофилов крови свидетельствует о наличии реакции аллерген — антитело (см. Антиген-антитело реакция). Природа антител, обусловливающих реакцию дегрануляции, остается неясной. Наиболее вероятно, что это реагины (см. Антитела, аллергические).

Прямая реакция дегрануляции базофилов при аллергии к пенициллину (слева — неизмененный базофил).

Существует две разновидности базофильного теста: 1) прямой тест, при к-ром реакция дегрануляции воспроизводится на спонтанно сенсибилизированных базофилах больного (лейкоциты больного + аллерген); 2) непрямой тест, при котором реакция дегрануляции воспроизводится на базофилах кролика или здорового человека (лейкоциты + исследуемая сыворотка больного + аллерген); в реакции лучше использовать лейкоциты кролика, содержащие много базофилов (4—12%). Непрямой тест получил большее распространение.

Материалы, используемые для прямого базофильного теста: 1) свежая кровь больного; 2) аллерген, повышенную чувствительность к которому предполагается исследовать; 3) фиксирующий раствор (6 мл этанола, 2 мл хлороформа и 2 мл ацетона); 4) целлюлозные мембранные фильтры.

Методика прямого базофильного теста

Смешивают 0,25 мл гепаринизированной крови больного и 0,025 мл аллергена. Через 5 минут к 0,1 мл смеси добавляют охлажденный фиксирующий раствор, который разрушает эритроциты, оставляя интактными лейкоциты. После фиксации в течение ночи при t° 4° лейкоциты ресуспензируют и фильтруют через целлюлозные мембранные фильтры в течение 20 минут. При этом базофилы остаются на фильтрах. Фильтры окрашивают в течение 30 секунд раствором толуидинового синего, обезвоживают в этаноле и просветляют в ксилоле. Подсчитывают 20 базофилов. Их классифицируют по размеру, окраске, числу и локализации базофильных гранул. Для «истощенных» базофилов характерно: 1) небольшое количество гранул; 2) небольшие слабо окрашенные гранулы; 3) значительное количество гранул, расположенных за пределами клетки. Тест считается положительным, если «истощено» (дегранулирует) больше половины базофилов.

Материалы, используемые для непрямого базофильного теста: 1) свежая или сохраняемая при t°—20° сыворотка крови больного; 2) аллерген; 3) концентрированная взвесь лейкоцитов кролика, полученная при центрифугировании гепаринизированной крови со скоростью 3000 об/мин в течение 5 минут в тонких стеклянных пробирках или полиэтиленовых трубочках; 4) предметные стекла, окрашенные раствором нейтральрота. Для каждого аллергена опытным путем подбирают ту концентрацию, которая не вызывает неспецифических изменений базофилов.

Методика непрямого базофильного теста

На окрашенное нейтральротом предметное стекло наносят одинаковое количество (по 0,005 мл) лейкоцитарной взвеси, исследуемой сыворотки больного и аллергена. Предметное стекло накрывают покровным, края которого смазаны вазелином, и ставят на 10 минут в термостат (при 37°). Параллельно ставят контрольные пробы: 1) исследуемая сыворотка со взвесью лейкоцитов (чтобы исключить неспецифическую дегрануляцию); 2) взвесь лейкоцитов с аллергеном. Реакцию наблюдают под микроскопом с иммерсией. Считают не менее 20 базофилов. Основные признаки повреждения базофилов следующие: разбухание и потеря сферичности, гранулолизис, выход гранул из клеток. Полное разрушение клетки с выходом гранул в окружающую среду («взрывчатая» дегрануляция) наблюдается крайне редко.

Выделяют три степени реакции дегрануляции: 1) слабая реакция (+)— дегрануляция при базофильном тесте превышает таковую в контроле на 10%; 2) умеренная реакция (+ +) — превышение дегрануляции в контроле на 15%; 3) резко положительная (+ + +) — превышение дегрануляции в контроле на 20% и более. Критерием положительного базофильного теста можно считать исчезновение гранул более чем у 70% базофилов. Ценность представляют только четко положительные результаты, а отрицательные не исключают состояния повышенной чувствительности к данному аллергену.

Библиогр.: Ишимова Л. М. и 3еличенко Л. И. Аллергические реакции форменных элементов крови и их значение для диагностики, в кн.: Аллергич. заболевания у детей, под ред. М. Я. Студеникина и Т. С. Соколовой, с. 144, М., 1971; Польнер А. А. Реакция дегрануляции базофильных лейкоцитов при аллергии к растительной пыльце, Тер. арх., г. 40, № 2, с. 103, 1968; Shelley W. В. New serologicai test for allergy in man, Nature (Lond.), v. 195, p. 1181, 1962; он жe, Indirect basophil degranulation test for allergy to penicillin and other drugs, J. Amer. med. Ass., v. 184, p. 171, 1963.

Источник